ANCA

Definisjon

• Screeningsundersøkelse til påvisning av antistoff mot nøytrofilt cytoplasma-antigen (ANCA) i serum ved bruk av ELISA-teknikk eller indirekte immunfluorescens teknikk (IIF)
• ANCA er en gruppe autoantistoffer, hovedsakelig av IgG type, som reagerer med antigener i cytoplasmaet fra de nøytrofile granulocyttene (azurofile granula)
• ANCA deles på bakgrunn av de mønstre som fremkommer ved indirekte immunfluorescens på grantulocytter, i to hovedgrupper:
  • p-ANCA – perinukleært mønster
    • Myeloperoxidase-antistoff (MPO)
    • Antistoffer mot elastase, lysozyme, lactoferrin med flere
  • c-ANCA – diffust kornet mønster i cytoplasma
    • Proteinase 3-antistof (Pr-3)
• Antistoff mot nøytrofilt cytoplasma-antigen i granulocytter
  • Antistoff mot antigenet proteinase-3 (PR3) kalles c-ANCA eller PR3-ANCA
  • Antistoff mot antigenet myeloperoksidase kalles p-ANCA

Patologi

• ANCA kan påvises ved mange autoimmune sykdommer, men er spesielt assosiert til primær vaskulitt i små blodkar
  • Wegeners granulomatose
  • Mikroskopisk polyangiitt
  • Glomerulonefritt
• Antistoffene er involvert i patogenesen og sykdomsprogresjonen ved bl.a. å fremme frigivelsen av lytiske enzymer fra granulocyttene, og derved fremkalle eller vedlikeholde den inflammatoriske prosessen i blodkarene (vaskulitt)
• ANCA kan ses ved en rekke andre tilstander f.eks. ulcerøs kolitt, men er i disse tilfelle ikke assosiert med vaskulitt og således kun en markør

NPU-kode

• NPU16401
• NPU12011
• NPU14533
• NPU28517
• NPU28335
• NPU28334
• NPU12011

Referanseområder

• Metodeavhengige verdier
• p-ANCA og c-ANCA
  • Negativ
  • Grenseverdien settes slik at 5% av de friske har en positiv verdi
• Svarangivelse
  • Resultatet angis enten kvalitativt som negativ/positiv eller semikvantitativt som et titer
  • Positive svar semikvantiteres i svakt, middels eller sterkt positiv ut fra fluorescens-intensiteten ved serum fortynnet 1:20
  • Positive resultater følges opp med kvantitativ bestemmelse av MPO-antistoff og Pr-3-antistoff (ELISA). Høyeste titertrinn ≥ 1280
• Pr-3-antistoff (ELISA)
  • Metodeavhengig
  • Negativ: < 2,0 kIU/L
  • Gråzone: 2,0-3,0 kIU/L
  • Positiv: > 3,0 kIU/L
• MPO-antistoff
  • Metodeavhengig
  • Negativ: 3,5 kIU/L
  • Gråzone: 3,5 - 5,0 kIU/L
  • Positiv: > 5,0 kIU/L

Aktuelle indikasjoner

• Mistanke om systemisk småkarsvaskulitter (diagnose og behandlingskontroll)
  • Wegeners granulomatose
    • Blødning fra øvre luftveier
    • Kronisk rhinitt
    • Sinusitt
  • Mikroskopisk polyangiitt
    • Allmenne symptomer
    • Lungesymptomer
    • Hudsymptomer
    • Nyrepåvirkning
• Glomerulonefritt med uklar genese
  • Hematuri, proteinuri, sylindre
• Klinisk mistanke om eksaserbasjoner
• Medikamentelt utløst lupus erythematosus

Testegenskaper

• Immunfluorescenstest
  • Ved positivt funn undersøkes det på MPO-antistoff og Pr-3-antistoff ved ELISA
• ELISA-tester
• Analysetester
  • Vanligvis utredes for MPO-antistoff og Pr-3-antistoff med ELISA
  • SSI: Screening av serum i fortynning 1:20 for ANCA ved Indirekte immunnfluorescens teknikk (IIF) på etanol fikserte humane nøytrofile granulocytter
  • Ved positivt funn undersøkes det på MPO-antistoff og PR-3-antistoff ved ELISA

Prøvetaking

• Serumprøve

Feilkilder

• ANA kan gi falsk positiv ANCA
• Positiv ANCA ses hos 2% av friske personer under 60 år

Vurdering av unormalt prøvesvar

Positiv prøve på ANCA, generelt

• Hvis immunfluorescens kombineres med kvantitativ bestemmelse av antistoffer mot Pr-3 og MPO, fås såvel høy sensitivitet og spesifisitet
• Hos pasienter med ANCA positiv grunnsykdom (Wegeners granulomatose, mikroskopisk polyangiitt, Churg-Straus’ syndrom) kan forløpet kompliseres med sekundær glomerulonefritt
  • Fokal nekrotiserende glomerulonefritt
• ANCA er normalt ikke forhøyet ved
  • Primær vaskulitt i store eller mellomstore arterier
  • Sekundær vaskulitt
  • Andre vaskulittformer f.eks. erythema nodosum

p-ANCA / MPO-ANCA

• Sterk positiv p-ANCA/MPO-antistoff tyder på mikroskopisk polyangiitt
• Positiv p-ANCA konfirmert med positive antistoffer mot MPO forekommer ved småkarsvaskulitter
  • Mikroskopisk polyangiitt: 50 – 80%
  • Churg-Straus’ syndrom: 50 – 80%
  • Schönleins purpura: sjelden
• Nivået av anti-MPO antistoffer korrelerer ikke med sykdomsaktivitet eller behandlingseffekt
• Positiv P-ANCA/Anti-MPO-antistoffer ses også ved andre tilstander
  • SLE
  • Systemisk sclerose
  • Infeksjon
  • Medikamentelt utløst LE
  • Primær skleroserende cholangitt
  • Goodpastures syndrom (glomerulær basalmembran-antistoff (GMB))

c-ANCA / Pr3-ANCA

• Sterk positiv c-ANCA/Pr-3-antistoff tyder på Wegeners granulomatose
• Positiv c-ANCA konfirmert med positive antistoffer mot Pr-3 forekommer ved Wegeners granulomatose
  • Aktiv generalisert form: 90%
  • Aktiv lokalisert form: 60%
  • Inaktiv form: 15%
• Positiv c-ANCA konfirmert med positive antistoffer mot Pr-3 forekommer ved
  • Mikroskopisk polyangiitt: 30%
  • Relapsing polychondritt: 20%
  • Fokal nekrotiserende glomerulonefritt: 30%
• Negative funn utelukker ikke Wegeners granulomatose
• Ofte er det en sammenheng mellom sykdomsaktivitet og titer

Oppfølging av unormalt prøvesvar

• Spesialistoppgave - biopsier av hud og nyre
• Positiv ANCA screening bør suppleres med Pr-3-antistoff, MPO-antistoff og GBM-antistoff